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La tinción de Rosa de Bengala

Actualizado: 10 abr

El Rosa de Bengala es un colorante especial que suele utilizarse en el diagnóstico de enfermedades oftalmológicas y así determinar la apoptosis y el grado de severidad de las células epiteliales corneales. (Fig.01)

Este colorante también es usado en la medicina veterinaria como componente determinante para la preparación del antígeno de Card-Test, también conocida como prueba rápida en placa o Rosa de Bengala. Con el propósito de diagnosticar infecciones activas de brucella por medio de una dilución 1:2, donde se enfrenta dicho antígeno ante el suero problema y así definir si hay presencia o ausencia de anticuerpos o inmunoglobulinas de tipo G1.

Este es un test cualitativo donde la señal de la prueba es la formación de grumos o aglutinación que determina la inmunoreacción antígeno-anticuerpo. Esta es la prueba oficial en Venezuela para el diagnóstico de brucelosis tanto en animales como en humanos.



La tinción de Rosa de Bengala utiliza un reactivo que contiene colorantes específicos que se unen a las estructuras celulares, en particular, al núcleo de las células. La composición exacta del reactivo puede variar ligeramente según el protocolo de tinción específico y el proveedor del reactivo. Sin embargo, de manera general, un reactivo de tinción de Rosa de Bengala podría incluir los siguientes componentes:

  1. Rosa de Bengala: El colorante principal que da nombre a la tinción. Este colorante se une al ADN presente en el núcleo celular, resaltando las estructuras nucleares.

  2. Ácido Acético: Este componente ayuda a fijar y acondicionar las células para la tinción. Además, contribuye a la penetración del colorante en las células.

  3. Agua Destilada o Solución Salina Suave: Se utiliza para realizar el lavado después de la aplicación del colorante. El lavado es crucial para eliminar el exceso de colorante y detener la acción de la tinción.


Tinción Rosa de Bengala (Fig.01)
Tinción Rosa de Bengala (Fig.01)

El rosa de Bengala es un colorante con afinidad por las células epiteliales muertas o desvitalizadas cuya capa de mucina se ha perdido o alterado.

Los filamentos y las placas corneales también se distinguen más claramente con este colorante, que puede visualizarse mejor si se usa un filtro aneritro.

Se emplea una solución de rosa de Bengala al 1% o bien una tira impregnada humedecida.

El colorante puede causar irritación intensa, que puede durar hasta 1 día, sobre todo en pacientes con queratitis grave; para minimizar la irritación hay que instilar una gota muy pequeña, justamente después de poner una gota de colirio anestésico, y luego lavar lo que sobre con suero fisiológico.


Prueba rápida en placas. El de la derecha es el reactor es el positivo o reactor.
Prueba rápida en placas. El de la derecha es el reactor es el positivo o reactor.

Es importante seguir las instrucciones específicas del proveedor o del protocolo de laboratorio para preparar el reactivo de tinción de Rosa de Bengala correctamente. En algunos casos, puede ser necesario diluir el colorante o ajustar otras condiciones según las necesidades específicas del procedimiento.

Ten en cuenta que el reactivo puede variar en términos de concentración y formulación, por lo que siempre es recomendable seguir las instrucciones proporcionadas con el kit de tinción o el protocolo de laboratorio específico que estés utilizando.



Aquí están los pasos básicos para llevar a cabo la tinción de Rosa de Bengala:

1. Preparación de la Muestra:

  • Comienza con una muestra biológica previamente fijada, por ejemplo, una muestra de tejido o un extendido citológico. Asegúrate de que la muestra esté completamente seca antes de comenzar el proceso de tinción.

2. Aplicación del Colorante:

  • Sumerge la muestra en una solución de Rosa de Bengala. Esta solución suele contener ácido acético y colorantes específicos que se unen a las estructuras nucleares.

  • Asegúrate de cubrir completamente la muestra con la solución de tinción y permite que esta actúe durante un tiempo determinado, generalmente unos minutos.

3. Lavado:

  • Después de la aplicación del colorante, lava la muestra con agua o una solución salina suave para eliminar el exceso de colorante y detener la acción de la tinción.

  • Este paso es esencial para eliminar cualquier colorante no unido a las estructuras celulares.

4. Deshidratación (Opcional):

  • En algunos protocolos, se puede realizar un paso de deshidratación utilizando una serie de alcohol para preparar la muestra para el montaje. Sin embargo, este paso puede variar según el procedimiento específico.

5. Montaje:

  • Coloca la muestra en un portaobjetos y cúbrelo con una lámina delgada de vidrio para proteger la muestra y permitir la observación microscópica.

  • Asegúrate de que la muestra esté completamente seca antes de montarla.

6. Observación Microscópica:

  • Coloca el portaobjetos en el microscopio y ajusta la iluminación y la resolución según sea necesario.

  • Observa las células bajo diferentes aumentos y enfócate especialmente en las características nucleares resaltadas por la tinción de Rosa de Bengala.

7. Documentación y Análisis:

  • Documenta los hallazgos observados mediante fotografías microscópicas o descripciones detalladas.

  • Analiza las características nucleares resaltadas por la tinción, como la forma y la morfología del núcleo.

Aplicaciones Prácticas de la Tinción de Rosa de Bengala

Identificación Bacteriana: La tinción de Rosa de Bengala es especialmente útil en la identificación de bacterias. Diferentes bacterias pueden adquirir colores distintos, permitiendo a los microbiólogos diferenciar entre especies.

Estudio de Tejidos Biológicos: En histología, esta técnica se utiliza para resaltar estructuras celulares en tejidos biológicos, facilitando el diagnóstico de enfermedades.

Investigación en Microbiología: Los investigadores utilizan la tinción de Rosa de Bengala para estudiar la morfología y la estructura celular de diversos microorganismos.



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Conclusiones Finales

La tinción de Rosa de Bengala abre una ventana única al mundo microscópico, permitiendo a los científicos y profesionales de la salud explorar y comprender la complejidad de las células y los microorganismos. Con su capacidad para resaltar estructuras específicas, esta técnica sigue siendo un pilar en la investigación biológica y médica, contribuyendo al avance del conocimiento en el ámbito de las ciencias biológicas. La próxima vez que observes una muestra teñida con Rosa de Bengala bajo el microscopio, recuerda que estás explorando un universo microscópico lleno de maravillas y descubrimientos. Es importante seguir las instrucciones específicas del laboratorio y el protocolo de tinción de Rosa de Bengala que estés utilizando, ya que los tiempos de tinción y otros detalles pueden variar según el procedimiento específico. Además, sigue prácticas seguras y éticas al manipular muestras biológicas y productos químicos.



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